DDX28 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412609-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX28O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDX28 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDX28 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDX28. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX28 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412609-NIC | 20 µg | $410.00 |
DDX28 codifica uma helicase de RNA da família DEAD-box localizada na mitocôndria, implicada no metabolismo de RNA e na remodelação de ribonucleoproteínas no compartimento mitocondrial. Está associada à regulação da expressão gênica mitocondrial, incluindo o processamento e a tradução de transcritos mitocondriais que sustentam a fosforilação oxidativa e a função da cadeia respiratória. Por meio de seus efeitos na homeostase mitocondrial, a DDX28 se conecta a vias de metabolismo energético celular e de adaptação ao estresse. Alterações na regulação do RNA mitocondrial e desequilíbrios bioenergéticos são características recorrentes em diversos contextos de doença, tornando a DDX28 um alvo útil para estudos mecanísticos de disfunção mitocondrial.
DDX28 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDX28 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDX28. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDX28. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDX28 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.