Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-409238
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Dcun1D4 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Dcun1D4基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
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Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-409238 | 20 µg | $397.00 |
概述
DCUN1D4 编码 Dcun1D4 蛋白，属于 DCN1 样家族成员。该家族被认为通过调控 cullin 的 NEDD8 化（neddylation），参与调节 cullin-RING 型 E3 泛素连接酶（CRL）的活性。通过影响依赖 NEDD8 的 cullin 复合体激活过程，Dcun1D4 可进而影响由泛素介导的蛋白质稳态、细胞周期进程，以及那些依赖底物及时周转的信号通路。NEDD8 化–泛素轴的活性改变与基因组稳定性和应激反应程序普遍相关，因此 DCUN1D4 是一个有助于在多种依赖 CRL 的过程中解析通路特异性的基因位点。多种疾病背景中都可观察到泛素化与 NEDD8 化机制的失调，这也支持对 DCUN1D4 在细胞稳态维持及通路扰动中的作用开展机制研究。
Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DCUN1D4基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DCUN1D4基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DCUN1D4开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Dcun1D4蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建DCUN1D4缺失的细胞模型，用于Dcun1D4信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Dcun1D4 功能至关重要的 DCUN1D4 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 DCUN1D4 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DCUN1D4 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Dcun1D4 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Dcun1D4 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DCUN1D4同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DCUN1D4靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。