Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DBP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403069-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DBPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DBP (h) e o Plasmídeo Double Nickase DBP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DBP Anticorpo (A-5): sc-365441
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DBP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403069-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DBP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403069-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano GC codifica a proteína ligadora de vitamina D (DBP), uma glicoproteína plasmática altamente abundante que se liga a metabolitos da vitamina D, os transporta e contribui para a regulação sistémica da homeostase do cálcio e do fosfato. Para além do transporte de vitamina D, a DBP participa na remoção (scavenging) de actina e pode influenciar processos imunitários e inflamatórios através da modulação da depuração de actina extracelular e das respostas dos leucócitos. A variação nos níveis e nas propriedades de ligação de GC/DBP tem sido estudada no contexto de doenças ósseas e do metabolismo mineral, fenótipos metabólicos e condições inflamatórias. Em contexto de investigação, o GC constitui um alvo acessível para explorar a dinâmica da sinalização da vitamina D, a comunicação cruzada endócrina e o processamento de proteínas extracelulares.
DBP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.