Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DAP-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420151
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DAP-5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DAP-5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DAP-5 Anticorpo (F-2): sc-137011
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DAP-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420151 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Eif4g2** de camundongo codifica a **DAP-5** (também conhecida como **eIF4G2**), um arcabouço não canônico de iniciação da tradução que sustenta a tradução de mRNAs **independente de cap**, particularmente em condições de estresse, quando a tradução dependente de cap é atenuada. A DAP-5 interage com componentes da maquinaria de iniciação e contribui para a tradução mediada por **IRES** de transcritos selecionados, moldando a produção do proteoma durante apoptose, estresse do retículo endoplasmático (RE) e privação de nutrientes. Por meio de seu papel no controle translacional, a DAP-5 influencia decisões de sobrevivência celular, progressão do ciclo celular e programas de diferenciação. A desregulação de redes translacionais ligadas a **EIF4G2/DAP-5** tem sido associada a contextos relevantes para transformação oncogênica, neurobiologia e fenótipos de adaptação ao estresse, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DAP-5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Eif4g2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Eif4g2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Eif4g2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DAP-5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Eif4g2 para a investigação da sinalização de DAP-5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Eif4g2 críticos para a função DAP-5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Eif4g2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DAP-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo DAP-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Eif4g2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DAP-5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR DAP-5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Eif4g2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Eif4g2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.