D2DR/Dopamine D2 Receptor Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420053

Visão geral

Drd2 codifica o recetor de dopamina D2 (D2DR), um GPCR acoplado a Gi/o que modula a excitabilidade neuronal e a transmissão sináptica ao inibir a adenilil ciclase, reduzir a sinalização cAMP/PKA e regular a atividade de canais iónicos. O D2DR também influencia vias relacionadas com MAPK/ERK e PI3K e atua como autorrecetor, controlando a libertação e a síntese de dopamina em circuitos dopaminérgicos. No cérebro do rato, o Drd2 contribui para a sinalização estriatal e corticolímbica subjacente à motivação, à aprendizagem por recompensa e ao controlo motor. A desregulação da sinalização do D2DR tem sido implicada na biologia de perturbações neuropsiquiátricas e de doenças do movimento, tornando o Drd2 um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos dos circuitos dopaminérgicos e da sinalização mediada por recetores.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO D2DR/Dopamine D2 Receptor (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Drd2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Drd2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Drd2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína D2DR/Dopamine D2 Receptor.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Drd2 para a investigação da sinalização de D2DR/Dopamine D2 Receptor, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Drd2 críticos para a função D2DR/Dopamine D2 Receptor
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Drd2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo D2DR/Dopamine D2 Receptor Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo D2DR/Dopamine D2 Receptor Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Drd2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo D2DR/Dopamine D2 Receptor Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR D2DR/Dopamine D2 Receptor (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Drd2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Drd2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.