D2DR/Dopamine D2 Receptor Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420053

Descripción general

Drd2 codifica el receptor de dopamina D2 (D2DR), un GPCR acoplado a Gi/o que modula la excitabilidad neuronal y la transmisión sináptica al inhibir la adenilato ciclasa, reducir la señalización de cAMP/PKA y regular la actividad de canales iónicos. El D2DR también influye en las vías MAPK/ERK y relacionadas con PI3K, y actúa como autorreceptor que controla la liberación y la síntesis de dopamina en circuitos dopaminérgicos. En el cerebro de ratón, Drd2 contribuye a la señalización estriatal y corticolímbica que sustenta la motivación, el aprendizaje por recompensa y el control motor. La señalización desregulada del D2DR se ha implicado en la biología de trastornos neuropsiquiátricos y del movimiento, lo que convierte a Drd2 en una diana ampliamente utilizada para estudios mecanísticos de circuitería dopaminérgica y de señalización mediada por receptores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO D2DR/Dopamine D2 Receptor (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Drd2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Drd2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Drd2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína D2DR/Dopamine D2 Receptor.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Drd2 para la investigación de la señalización de D2DR/Dopamine D2 Receptor, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Drd2 críticos para la función de D2DR/Dopamine D2 Receptor
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Drd2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido D2DR/Dopamine D2 Receptor CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido D2DR/Dopamine D2 Receptor CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Drd2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR D2DR/Dopamine D2 Receptor (m) y el plásmido HDR D2DR/Dopamine D2 Receptor (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Drd2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Drd2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.