CYP2S1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405785

概要

CYP2S1は、肝外組織に発現するモノオキシゲナーゼであるシトクロムP450 2S1をコードし、内因性脂質や外因性化学物質（ゼノバイオティクス）基質の酸化的代謝を触媒します。CYP2S1はアラキドン酸およびエイコサノイドのシグナル伝達と関連づけられており、炎症やストレス応答プログラムに影響し得る脂肪酸由来メディエーターの酸素化にも関与します。CYP2S1の発現は上皮組織で高く、環境要因や酸化ストレスのシグナルによって制御されることから、バリア機能の生物学や化学防御における役割が示唆されます。CYP2S1の活性や発現の破綻は、炎症やがん生物学といった文脈で、ゼノバイオティクス処理やレドックス恒常性の変化と関連して報告されており、代謝に駆動される表現型の機序研究において重要です。

CYP2S1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCYP2S1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CYP2S1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CYP2S1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CYP2S1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CYP2S1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CYP2S1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CYP2S1の機能に不可欠なCYP2S1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CYP2S1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CYP2S1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCYP2S1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CYP2S1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CYP2S1 HDRプラスミド（h）および CYP2S1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCYP2S1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCYP2S1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。