CYP2A6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403448
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP2A6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CYP2A6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP2A6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403448 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CYP2A6 codifica uma monooxigenase humana do citocromo P450 que catalisa o metabolismo oxidativo de uma variedade de xenobióticos e de alguns substratos endógenos selecionados, contribuindo para a homeostase química celular e o equilíbrio redox. Como uma hemoproteína localizada no retículo endoplasmático, o CYP2A6 atua nas vias de metabolismo de fármacos de fase I e coopera com a redutase do citocromo P450 dependente de NADPH para viabilizar a transferência de elétrons durante a oxidação de substratos. Variações na expressão ou na atividade do CYP2A6 podem alterar o fluxo metabólico e influenciar a suscetibilidade à toxicidade induzida por agentes químicos e à ativação de carcinógenos, tornando-o relevante para estudos de diversidade farmacogenômica e de mecanismos de doença relacionados à exposição. Seu enriquecimento hepático e sua regulação induzível também favorecem investigações sobre controle transcricional, estabilidade enzimática e respostas adaptativas a substâncias químicas ambientais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CYP2A6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CYP2A6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CYP2A6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CYP2A6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CYP2A6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CYP2A6 para a investigação da sinalização de CYP2A6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CYP2A6 críticos para a função CYP2A6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CYP2A6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CYP2A6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CYP2A6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CYP2A6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CYP2A6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CYP2A6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CYP2A6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CYP2A6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.