CYP26B1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403610

概要

CYP26B1は、全トランス型レチノイン酸（all-trans-retinoic acid）および関連レチノイドの酸化的分解（異化）を触媒するシトクロムP450ファミリーのレチノイン酸水酸化酵素をコードしており、これにより細胞内レチノイド勾配を制御します。レチノイン酸の利用可能性を調節することで、CYP26B1は分化、形態形成、組織恒常性を制御するRA受容体（RAR/RXR）依存的な転写プログラムに影響を与えます。また、その活性は、レチノイド代謝と下流の遺伝子制御経路を介して、発生シグナル伝達ネットワークや細胞運命決定とも交差します。CYP26B1の発現や機能の破綻は、先天性の発生表現型や、がん生物学および炎症過程に関わるレチノイドシグナルの変化した状況と関連していることが示唆されており、レチノイド恒常性の機序解析において有用な結節点となります。

CYP26B1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCYP26B1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CYP26B1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CYP26B1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CYP26B1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CYP26B1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CYP26B1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CYP26B1の機能に不可欠なCYP26B1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CYP26B1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CYP26B1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCYP26B1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CYP26B1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CYP26B1 HDRプラスミド（h）および CYP26B1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCYP26B1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCYP26B1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。