CSN1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404934-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CSN1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CSN1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CSN1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CSN1 Anticorpo (E-4): sc-514086
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CSN1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CSN1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **GPS1** humano codifica a subunidade 1 do signalossoma COP9 (CSN1), um componente central do signalossoma COP9 que regula ligases de ubiquitina do tipo cullin-RING ao controlar a neddilação de cullinas e coordenar a degradação de proteínas dependente de ubiquitina. Por meio dessa atividade, a CSN1 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a sinalização de estresse, cruzando-se com vias como MAPK e NF-κB, que moldam programas de transcrição e a proteostase. A perturbação da função do signalossoma COP9 tem sido associada à alteração da estabilidade de reguladores-chave, incluindo ciclinas e fatores de transcrição, contribuindo para proliferação desregulada e comprometimento da manutenção do genoma. Assim, GPS1/CSN1 é de interesse para estudos mecanísticos em biologia do câncer, sinalização relacionada à inflamação e investigações mais amplas do controle da via ubiquitina–proteassoma.
CSN1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.