Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CS1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401906-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CS1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CS1ダブルニカースプラスミド（h）およびCS1ダブルニカースプラスミド（h2）は、SLAMF7を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CS1 抗体 (162.1): sc-53577
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CS1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401906-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CS1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401906-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLAMF7（CS1とも呼ばれる）は、主にナチュラルキラー（NK）細胞、T細胞の一部サブセット、および形質細胞に発現するヒト免疫受容体であり、細胞間認識と免疫調節性シグナル伝達を仲介します。ホモフィリックな相互作用や、EAT-2などのアダプタータンパク質のリクルートを介して、CS1は細胞傷害活性化、サイトカイン放出、免疫シナプス形成に影響します。SLAMF7依存性経路はリンパ球の活性化・分化の制御とも交差し、炎症性免疫応答や抗腫瘍免疫応答の形成に関与します。SLAMF7の発現やシグナル伝達の異常は、形質細胞生物学、免疫回避、血液疾患の病態機序と関連してしばしば研究されています。
CS1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における SLAMF7 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、SLAMF7内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、SLAMF7の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、SLAMF7が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。