connexin 26 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402132-LAC

GJB2は、ギャップ結合チャネルタンパク質であるコネキシン26をコードしており、コネキソンへと集合することで、イオンや小分子代謝産物の細胞間での直接的なやり取りを媒介し、電気的・代謝的なカップリングを支えます。コネキシン26は、上皮や感覚組織におけるシグナル伝達を協調させることで組織の恒常性を調節し、その結果として細胞分化、ストレス応答、バリア機能に影響を及ぼします。GJB2の発現変化やコネキシン26チャネル機能の異常は、遺伝性難聴やその他の上皮生理に関わる疾患と強く関連しているため、蝸牛生物学やギャップ結合コミュニケーションのモデルにおいて広く用いられる標的となっています。研究の場では、コネキシン26は、ギャップ結合の動態、細胞間連結性、接合タンパク質の転写制御を解析するための扱いやすい入口を提供します。

connexin 26 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なGJB2の発現上昇を可能にします。

connexin 26 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、GJB2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性connexin 26の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のGJB2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。