Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CNT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404790-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNT1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CNT1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CNT1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC28A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CNT1 Anticorpo (G-7): sc-515874
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404790-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CNT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404790-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC28A1 codifica o transportador concentrativo de nucleosídeos 1 (CNT1), um transportador de alta afinidade dependente de sódio que medeia a captação celular de nucleosídeos pirimidínicos, como uridina e citidina, através da membrana plasmática. Ao controlar a via de salvamento de nucleosídeos, o CNT1 influencia a homeostase dos pools de nucleotídeos e dá suporte à síntese de DNA/RNA, conectando o transporte de membrana à replicação, ao reparo e à progressão do ciclo celular. A atividade do CNT1 se integra a programas metabólicos mais amplos que equilibram a biossíntese de novo de nucleotídeos com a via de salvamento, e a alteração de sua expressão tem sido associada a mudanças na diferenciação epitelial e na capacidade proliferativa em múltiplos contextos teciduais. Como resultado, o SLC28A1 é frequentemente estudado na biologia do transporte de nucleosídeos, em respostas ao estresse metabólico e em mecanismos que modulam a sensibilidade à disponibilidade de nucleosídeos em modelos relevantes para doenças.
CNT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC28A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC28A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC28A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC28A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.