CLEC-3A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417520

概要

CLEC3Aは、細胞外マトリックス（ECM）の構築や細胞‐マトリックス間コミュニケーションに関与するとされる、分泌型のC型レクチンドメイン含有タンパク質CLEC-3Aをコードします。CLEC-3Aは、コラーゲン相互作用の調節や組織リモデリング過程と関連づけられており、これらは接着、遊走、ならびに炎症性微小環境におけるシグナル伝達と交差します。ヒト組織では、線維化、創傷修復、腫瘍随伴間質といった状況でCLEC3A発現の変化が報告されており、リモデリング駆動型の表現型におけるマーカーおよび機構的な要所としての有用性が示唆されています。これらの特性により、レクチン様タンパク質が上皮‐間葉系の挙動や免疫細胞のトラフィッキングに影響する細胞外の手がかり（extracellular cues）をどのように形成するかを研究する上で、CLEC3Aは重要な対象となります。

CLEC-3A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCLEC3A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CLEC3A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CLEC3Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CLEC-3Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CLEC-3Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CLEC3A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CLEC-3Aの機能に不可欠なCLEC3Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CLEC3Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CLEC-3A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCLEC-3A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CLEC3A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CLEC-3A HDRプラスミド（h）および CLEC-3A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCLEC3Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCLEC3A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。