claudin-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403405

Visão geral

CLDN6 codifica a claudina-6, uma proteína de junção oclusiva com quatro domínios transmembrana que contribui para a formação da barreira epitelial e para o controle da permeabilidade paracelular por meio da montagem de filamentos baseados em claudinas. Ao regular a adesão célula–célula, a polaridade e a sinalização associada às junções, a claudina-6 pode influenciar processos ligados à diferenciação epitelial, migração e organização tecidual. Alterações na expressão de CLDN6 foram relatadas em múltiplos contextos tumorais, nos quais frequentemente é estudada em relação ao remodelamento de junções, a mudanças no estado epitelial e a vias associadas à invasão. Como CLDN6 é regulado durante o desenvolvimento e muitas vezes apresenta expressão limitada em tecidos adultos, também é utilizado como marcador para investigar programas de linhagem e fenótipos juncionais em modelos celulares humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO claudin-6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CLDN6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CLDN6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CLDN6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína claudin-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CLDN6 para a investigação da sinalização de claudin-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CLDN6 críticos para a função claudin-6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CLDN6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo claudin-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo claudin-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CLDN6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo claudin-6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR claudin-6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CLDN6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CLDN6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.