CLASP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403609-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLASP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLASP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CLASP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CLASP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLASP2 Anticorpo (F-3): sc-376496
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLASP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403609-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLASP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403609-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLASP2 (proteína 2 associada ao ligante citoplasmático) é uma proteína rastreadora da extremidade “plus” dos microtúbulos que estabiliza e organiza os microtúbulos no córtex celular e nos cinetócoros, sustentando a montagem do fuso, a segregação cromossômica e a migração celular direcional. Ao acoplar microtúbulos a complexos corticais e associados à adesão, a CLASP2 contribui para a comunicação cruzada do citoesqueleto que influencia a polaridade celular e a fidelidade mitótica. Sua regulação se cruza com redes de sinalização que controlam a dinâmica dos microtúbulos e a geometria de ligação, incluindo vias que governam o posicionamento do fuso e a função do centrossomo. A atividade ou expressão desregulada de CLASP2 tem sido associada à mitose aberrante e a alterações no comportamento migratório, tornando-a relevante para estudos de instabilidade genômica e fenótipos proliferativos em modelos celulares relevantes para doenças.
CLASP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CLASP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CLASP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CLASP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CLASP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.