Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CLASP2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403609-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CLASP2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CLASP2ダブルニカースプラスミド（h）およびCLASP2ダブルニカースプラスミド（h2）は、CLASP2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CLASP2 抗体 (F-3): sc-376496
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CLASP2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403609-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLASP2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403609-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLASP2（cytoplasmic linker–associated protein 2）は、微小管のプラス端に追従するタンパク質（＋端追跡タンパク質）であり、細胞皮質および動原体において微小管を安定化・組織化し、紡錘体の形成、染色体分配、ならびに方向性のある細胞移動を支えます。微小管を皮質および接着関連複合体に連結することで、CLASP2は細胞骨格間のクロストークに寄与し、細胞極性や有糸分裂の正確性に影響を及ぼします。その制御は、微小管動態や結合の幾何学的配置を調節するシグナル伝達ネットワークと交差しており、紡錘体の位置決めや中心体機能を司る経路も含まれます。CLASP2の活性または発現の異常は、異常な有糸分裂や移動挙動の変化と関連づけられており、疾患関連の細胞モデルにおけるゲノム不安定性や増殖性表現型の研究において重要です。
CLASP2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CLASP2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CLASP2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CLASP2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CLASP2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。