Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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citrate synthase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402227-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- citrate synthase Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- citrate synthase 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 citrate synthase 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 CS을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 citrate synthase Antibody (G-3): sc-390693
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
citrate synthase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-402227-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
citrate synthase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-402227-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
인간 CS 유전자는 미토콘드리아 기질(matrix)에 존재하는 효소인 시트르산 합성효소(citrate synthase)를 암호화하며, 이 효소는 옥살로아세트산과 아세틸‑CoA의 축합 반응을 촉매해 시트르산을 생성함으로써 삼카복실산(TCA) 회로로의 흐름을 시작합니다. 시트르산 합성효소는 산화적 대사로의 유입을 조절함으로써 전자전달계에 필요한 NADH/FADH2 생산을 뒷받침하고, 탄수화물·지질·아미노산 대사를 연결하는 애나플레로시스/카타플레로시스에도 영향을 미칩니다. CS 활성은 미토콘드리아 생물에너지, 산화환원 항상성, 그리고 지방산 및 스테롤 합성과 같은 시트르산 의존적 생합성 과정과도 맞물려 있습니다. TCA 회로 기능을 포함한 미토콘드리아 대사의 변화는 대사 조절 이상, 신경퇴행, 그리고 미토콘드리아 용량과 기질 이용이 재구성되는 증식성 표현형 등의 맥락에서 자주 연구됩니다.
citrate synthase 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CS 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CS 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CS의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CS 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.