CIRP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405185-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CIRPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CIRP (h) e o Plasmídeo Double Nickase CIRP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CIRBP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CIRP Anticorpo (1C9): sc-293325
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CIRP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CIRP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína ligante de RNA induzível pelo frio (CIRP), codificada por **CIRBP**, é uma chaperona de RNA responsiva ao estresse que modula a estabilidade do mRNA, a tradução e a localização subcelular em resposta à hipotermia, à irradiação UV e ao estresse oxidativo. A CIRP participa de redes regulatórias pós-transcricionais que influenciam o controle do ciclo celular, a apoptose e a sinalização inflamatória, incluindo a dinâmica de grânulos de estresse e vias mais amplas do metabolismo de RNA. A expressão ou a localização alteradas de **CIRBP** têm sido associadas a adaptação ao estresse e respostas imunes desreguladas, com relevância para a biologia do câncer, a neuroinflamação e a lesão celular relacionada à isquemia. Como proteína multifuncional de ligação a RNA, a CIRP oferece um ponto acessível para dissecar como o estresse ambiental remodela programas de expressão gênica no nível do RNA.
CIRP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CIRBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CIRBP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CIRBP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CIRBP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.