CHP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406233

概要

CHP1は、カルシニューリンBホモログタンパク質（CHP）をコードしており、複数の膜輸送体やシグナル伝達タンパク質と会合する、ミリストイル化されたEFハンド型のCa2+結合性調節因子です。CHPは、Na+/H+交換体の活性を調節することで最もよく知られており、細胞内Ca2+動態をpH恒常性、イオン輸送、ならびに細胞容積や細胞骨格構築の制御へと結び付けます。これらの機能を介して、上皮の極性、増殖、ストレス応答を司る経路に影響を及ぼし得ます。CHP1が関与するCa2+シグナル伝達や交換体調節の破綻は、イオンバランスおよびpH調節の変化が病態形成に寄与する腫瘍細胞の挙動など、さまざまな疾患コンテキストで検討されています。

CHP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCHP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CHP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CHP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CHPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CHPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CHP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CHPの機能に不可欠なCHP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CHP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CHP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCHP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CHP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CHP HDRプラスミド（h）および CHP HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCHP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCHP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。