Cdk8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435217
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdk8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Cdk8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdk8 Anticorpo (D-9): sc-13155
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdk8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-435217 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A quinase dependente de ciclina 8 (Cdk8) é uma quinase de serina/treonina associada ao complexo Mediator que regula a transcrição dependente da RNA polimerase II ao fosforilar fatores de transcrição e componentes da maquinaria transcricional. Em células de camundongo, a Cdk8 integra sinais de vias como Wnt/β-catenina, TGF-β/SMAD e MAPK para modular a progressão do ciclo celular, programas de diferenciação e a expressão de genes responsivos ao estresse. Por meio do controle da atividade de enhancers e promotores, a Cdk8 influencia resultados transcricionais metabólicos e inflamatórios e pode moldar redes transcricionais específicas de linhagem. A atividade desregulada de CDK8 tem sido associada à regulação transcricional aberrante em contextos oncogênicos e do desenvolvimento, tornando a Cdk8 um alvo relevante para estudos mecanísticos do controle transcricional e do crosstalk entre vias de sinalização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cdk8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cdk8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cdk8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cdk8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cdk8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cdk8 para a investigação da sinalização de Cdk8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cdk8 críticos para a função Cdk8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cdk8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Cdk8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Cdk8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cdk8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Cdk8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Cdk8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cdk8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cdk8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.