Cdk3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400846-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdk3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdk3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdk3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDK3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdk3 Anticorpo (4B6): sc-81836
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdk3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400846-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdk3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400846-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK3 codifica a quinase 3 dependente de ciclina (Cdk3), uma quinase de serina/treonina que contribui para o controle do ciclo celular ao coordenar interações com ciclinas e eventos de fosforilação ligados à saída de G0/G1 e à progressão inicial de G1. A atividade da Cdk3 se cruza com a sinalização central CDK–ciclina e com programas transcricionais regulados por RB/E2F a jusante, que governam a proliferação e as respostas a checkpoints. Expressão ou atividade desregulada de CDK3 foi relatada em múltiplos contextos de câncer, nos quais a sinalização quinase alterada pode influenciar crescimento, migração e vias adaptativas ao estresse. Como resultado, CDK3 é frequentemente investigado por seu papel em redes de sinalização proliferativa e nos determinantes moleculares de fenótipos associados a tumores.
Cdk3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDK3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDK3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDK3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.