CDCP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430933

Visão geral

Cdcp1 codifica a CDCP1, uma glicoproteína transmembranar de passagem única enriquecida na superfície celular, onde atua como um hub de ancoragem (scaffold) e de sinalização para vias responsivas à adesão e ao estresse. A CDCP1 sofre fosforilação em tirosina e interage com quinases da família Src e com a sinalização de PKC, influenciando a remodelação do citoesqueleto, a migração celular, a sobrevivência e as interações com a matriz extracelular. Em sistemas murinos, a atividade de Cdcp1 tem sido associada ao comportamento de células epiteliais e estromais, à resistência à anoikis e à regulação dependente do contexto de fenótipos invasivos. A sinalização desregulada de CDCP1 é frequentemente investigada em modelos de progressão tumoral, programas associados à metástase e microambientes inflamatórios, o que a torna relevante para a investigação mecanística de vias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CDCP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cdcp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cdcp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cdcp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CDCP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cdcp1 para a investigação da sinalização de CDCP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cdcp1 críticos para a função CDCP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cdcp1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CDCP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CDCP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cdcp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CDCP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CDCP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cdcp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cdcp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.