Cdc5L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404611-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdc5LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdc5L (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdc5L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDC5L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdc5L Anticorpo (D-11): sc-398280
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdc5L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404611-NIC | 20 µg | $410.00 |
CDC5L codifica a Cdc5L, uma proteína nuclear conservada que atua como componente central do complexo associado à Prp19, necessário para a ativação do spliceossomo e o splicing do pré-mRNA. A Cdc5L sustenta o processamento correto de éxon–íntron e coordena-se com o controle do ciclo celular ao promover a progressão mitótica, conectando o metabolismo de RNA às vias de checkpoint e de resposta a dano no DNA. Por meio dessas funções, CDC5L influencia a fidelidade do transcriptoma e a estabilidade do genoma, processos frequentemente perturbados em distúrbios proliferativos e cânceres. Alterações na atividade de CDC5L têm sido associadas a programas de splicing desregulados e a dinâmicas anômalas do ciclo celular, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados pelo processamento de RNA.
Cdc5L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDC5L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDC5L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDC5L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDC5L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.