Cdc20 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400583-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdc20O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdc20 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdc20 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDC20. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdc20 Anticorpo (E-7): sc-13162
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdc20 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400583-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdc20 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400583-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDC20 codifica a Cdc20, um coativador central do complexo promotor da anáfase/ciclossoma (APC/C) que coordena a sinalização do checkpoint de montagem do fuso mitótico com a degradação mediada por ubiquitina de reguladores mitóticos-chave, incluindo securina e ciclina B1. Ao promover o início oportuno da anáfase e a saída da mitose, a Cdc20 ajuda a manter a fidelidade da segregação cromossômica e a estabilidade genômica global. A atividade de CDC20 é regulada por proteínas de checkpoint como MAD2 e BUBR1, ligando-a a vias de vigilância do ciclo celular que limitam a aneuploidia. A expressão desregulada de CDC20 ou o controle defeituoso do checkpoint é frequentemente associada a fenótipos proliferativos e à instabilidade cromossômica observados em múltiplos contextos de pesquisa em câncer.
Cdc20 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDC20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDC20. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDC20. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDC20 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.