CD79B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421055

Panoramica

Cd79b codifica CD79B (Igβ), una subunità di segnalazione essenziale del complesso del recettore dell’antigene delle cellule B (BCR) che si associa a CD79A per collegare il legame delle immunoglobuline di superficie alla segnalazione intracellulare. Tramite il suo motivo ITAM, CD79B coordina il reclutamento di chinasi e proteine adattatrici per propagare vie dipendenti dal BCR che regolano lo sviluppo, l’attivazione, il processamento dell’antigene e la sopravvivenza delle cellule B. La funzione di CD79B è strettamente legata a cascate a valle, incluse la segnalazione mediata da SYK/BTK e l’attivazione delle vie NF-κB e MAPK, modellando le risposte immunitarie e la tolleranza. La segnalazione BCR deregolata e l’espressione o la funzione alterate di CD79B sono comunemente studiate nel contesto dei meccanismi delle neoplasie delle cellule B e della disregolazione immunitaria, rendendo Cd79b un locus utile per interrogare le reti di segnalazione delle cellule B.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD79B (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cd79b in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cd79b insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cd79b a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD79B.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cd79b per lo studio della segnalazione di CD79B, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Cd79b critici per la funzione di CD79B
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cd79b per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD79B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CD79B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cd79b. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD79B Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CD79B (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cd79b per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cd79b definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.