CD68 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419565

概要

Cd68はCD68をコードしており、CD68は高度に糖鎖修飾されたリソソーム／エンドソーム膜タンパク質で、単球、組織マクロファージ、ミクログリア、樹状細胞、破骨細胞に豊富に発現します。貪食細胞系譜のマーカーとして一般的に用いられ、エンドサイトーシス、ファゴリソソーム成熟、抗原プロセシング、ならびに炎症性シグナルを形作る自然免疫活性化プログラムと関連しています。CD68陽性の骨髄系集団は、腫瘍微小環境や慢性炎症の状況において、組織リモデリング、脂質代謝（脂質ハンドリング）、サイトカインネットワークに影響を及ぼします。Cd68発現の変化やCD68+細胞の蓄積は、神経炎症、動脈硬化、線維化、自己免疫疾患モデルにおいて、マクロファージ／ミクログリアの活性化および浸潤の指標として頻繁に研究されています。

CD68 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd68遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd68内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd68のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD68タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD68シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd68欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD68の機能に不可欠なCd68エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd68ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD68 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD68 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd68遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD68 HDRプラスミド（m）および CD68 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd68ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd68標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。