CD68 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419565

Descripción general

Cd68 codifica CD68, una proteína de membrana lisosomal/endosomal fuertemente glicosilada, enriquecida en monocitos, macrófagos tisulares, microglía, células dendríticas y osteoclastos. Se utiliza habitualmente como marcador del linaje fagocítico y se asocia con la endocitosis, la maduración fagolisosomal, el procesamiento de antígenos y programas de activación de la inmunidad innata que modelan la señalización inflamatoria. Las poblaciones mieloides CD68 positivas influyen en la remodelación tisular, el manejo de lípidos y las redes de citocinas dentro del microambiente tumoral y en contextos de inflamación crónica. La expresión alterada de Cd68 y la acumulación de células CD68+ se estudian con frecuencia en modelos de neuroinflamación, aterosclerosis, fibrosis y enfermedades autoinmunes como indicadores de activación e infiltración de macrófagos/microglía.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD68 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd68 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd68 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd68 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD68.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd68 para la investigación de la señalización de CD68, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cd68 críticos para la función de CD68
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd68 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CD68 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD68 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd68. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD68 (m) y el plásmido HDR CD68 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd68 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd68 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.