Plasmide Double Nickase (h) CD5L: sc-404865-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD5L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD5L Double Nickase (h) et le plasmide CD5L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD5L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD5L Antibody (F-1): sc-514283
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD5L | sc-404865-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD5L | sc-404865-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD5L (CD5 molecule-like), également connu sous le nom d’AIM, code une protéine sécrétée de type récepteur éboueur riche en cystéines, produite principalement par les macrophages et d’autres cellules myéloïdes. CD5L se lie aux lipides et à des composants microbiens afin de moduler l’homéostasie de l’immunité innée, en influençant la survie des macrophages, l’efferocytose et la polarisation inflammatoire. Il est impliqué dans des voies qui régissent le métabolisme lipidique et la régulation immunitaire, notamment des réponses qui façonnent l’inflammation tissulaire et le stress métabolique. Une expression altérée de CD5L a été associée à des troubles inflammatoires et métaboliques ainsi qu’à la biologie des macrophages associés aux tumeurs, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques en immunométabolisme et en recherche sur le microenvironnement.
CD5L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD5L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD5L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD5L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD5L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.