Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD46 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400968-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CD46 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CD46ダブルニカースプラスミド（h）およびCD46ダブルニカースプラスミド（h2）は、CD46を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CD46 抗体 (C-10): sc-166159
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CD46 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-400968-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD46 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-400968-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD46（膜補因子タンパク質：membrane cofactor protein）は、ほぼ全身の細胞で発現する補体系制御糖タンパク質であり、第I因子によるC3bおよびC4bの切断反応の補因子として働くことで、自己補体による攻撃から宿主細胞を保護します。これにより、古典経路および代替経路における増幅を抑制します。細胞表面での機能を通じて、CD46は自然免疫シグナル伝達、炎症の基調、細胞間相互作用を調節し、白血球活性化や上皮バリア機能などのプロセスにも関与します。CD46の機能や発現の異常は、非典型溶血性尿毒症症候群をはじめとする、補体が関与する病態やその他の免疫介在性炎症性疾患と関連づけられています。さらにCD46は一部の病原体の受容体としても働くため、宿主—微生物相互作用や免疫回避の研究においても重要です。
CD46 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CD46 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CD46内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CD46の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CD46が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。