Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419557
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD4 Anticorpo (MT310): sc-19641
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419557 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd4 codifica o CD4, uma glicoproteína transmembrana do tipo I expressa predominantemente em células T auxiliares e em um subconjunto de timócitos, onde atua como co-receptor que estabiliza o reconhecimento do MHC classe II pelo TCR e promove a sinalização dependente de Lck. Por meio de sua associação com o complexo do TCR, o CD4 contribui para a seleção tímica, para os limiares de ativação das células T e para vias a jusante que moldam a diferenciação em linhagens efetoras e reguladoras. A sinalização alterada dependente de CD4 e a homeostase de células T CD4+ são centrais para a desregulação imune em contextos autoimunes e inflamatórios, e mudanças na função de células T CD4+ também são relevantes para a imunologia do tumor e para as interações hospedeiro–patógeno. Em modelos murinos, a perturbação de Cd4 é amplamente utilizada para dissecar a apresentação de antígenos, a polarização impulsionada por citocinas e o comportamento das redes imunes adaptativas in vivo e in vitro.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd4 para a investigação da sinalização de CD4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd4 críticos para a função CD4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.