CD37 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-419547-LAC

Cd37 codifica o CD37, uma glicoproteína de superfície da família das tetraspaninas, altamente expressa em células B e em outros subconjuntos de leucócitos, onde organiza microdomínios de membrana que coordenam a sinalização de receptores. O CD37 modula o receptor de células B e vias coestimuladoras, influenciando a atividade de quinases da família Src, a sinalização PI3K/AKT, o fluxo de cálcio e programas transcricionais a jusante que moldam a ativação, a proliferação e a sobrevivência. Por meio do seu papel no tráfego e no agrupamento de receptores imunes e moléculas de adesão, o CD37 contribui para a apresentação de antígenos, a migração celular e a formação da sinapse imunológica. Alterações na expressão ou na função do CD37 têm sido associadas à desregulação imune e à biologia de doenças hematológicas ligadas às células B, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos de redes de sinalização de linfócitos.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD37 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Cd37 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD37 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Cd37, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CD37. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Cd37 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.