CD28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419541

概要

Cd28は、T細胞上の主要な共刺激受容体であるCD28をコードしており、TCRシグナル伝達を増強することで、完全な活性化、IL-2産生、増殖、生存を支えます。抗原提示細胞上のCD80/CD86によるCD28の結合（刺激）により、PI3K–AKT–mTOR経路およびNF-κB/AP-1による転写プログラムが活性化され、エフェクター分化や代謝リプログラミングが形成されます。活性化の閾値を設定し、制御性T細胞（Treg）の恒常性を促進することで、CD28は末梢免疫寛容、慢性炎症、自己免疫や感染のマウスモデルで観察される免疫調節異常の表現型に影響します。CD28シグナルの変化は、腫瘍の免疫回避や免疫病理の研究においても重要であり、チェックポイントと共刺激ネットワークを検証する研究と関連します。

CD28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd28遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd28内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd28のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD28タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD28シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd28欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD28の機能に不可欠なCd28エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd28ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd28遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD28 HDRプラスミド（m）および CD28 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd28ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd28標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。