CD26 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-400862-ACT

DPP4はCD26をコードしており、CD26はII型膜貫通型糖タンパク質で、ジペプチジルペプチダーゼ活性を介して特定のケモカイン、インクレチン、その他の生理活性ペプチドを切断・短縮することで、細胞外シグナル伝達の濃度勾配や免疫細胞のトラフィッキング形成に関与する。酵素的プロセシングにとどまらず、CD26は細胞外マトリックスや細胞表面分子との相互作用を通じて、共刺激シグナル伝達や接着関連プロセスにも関与し、T細胞活性化や炎症応答に影響を及ぼす。ヒト組織においてDPP4/CD26の発現は、白血球の遊走、サイトカインシグナル伝達、代謝調節を司る経路との関連が報告されている。CD26の活性や発現の異常は、免疫介在性炎症、腫瘍微小環境の生物学、代謝性疾患の機序などの文脈で研究されている。

CD26 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性DPP4の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

CD26 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における DPP4 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はDPP4転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CD26の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のDPP4遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCD26依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびDPP4発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCD26経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。