CD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419537
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD2 Anticorpo (RM2-5): sc-19639
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419537 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Cd2 de camundongo codifica o CD2, um receptor de adesão e sinalização da superfamília das imunoglobulinas, expresso predominantemente em células T e células NK, que medeia o contato célula–célula por meio da interação com ligantes como CD58/CD48. O CD2 participa da formação da sinapse imunológica e da sinalização coestimuladora, modulando os limiares de ativação de células T, a remodelação do citoesqueleto e vias a jusante, incluindo as vias de sinalização de quinases da família Src, MAPK e NF-κB. Ao influenciar a adesão, a migração e a diferenciação efetora de linfócitos, o CD2 contribui para a regulação das respostas imunes adaptativas e para a homeostase imunológica. Sinalização e adesão dependentes de CD2 desreguladas têm sido implicadas em fenótipos imunes associados à inflamação e à autoimunidade, sustentando seu uso em estudos mecanísticos da função de células T.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd2 para a investigação da sinalização de CD2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd2 críticos para a função CD2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.