CD163 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-429989

Panoramica

Cd163 codifica CD163, un recettore scavenger arricchito in macrofagi e monociti che lega i complessi emoglobina–aptoglobina e ne favorisce l’endocitosi e la rimozione, collegando il riciclo del ferro ai programmi infiammatori della fase di risoluzione. CD163 partecipa alla regolazione dell’immunità innata attraverso il traffico endocitico e la modulazione delle risposte citochiniche, ed è comunemente associato a fenotipi di macrofagi attivati in modo alternativo in contesti di riparazione tissutale. Nei modelli murini, le popolazioni mieloidi CD163-positive vengono impiegate per studiare i microambienti infiammatori, la polarizzazione dei macrofagi e il crosstalk mieloide–stromale in condizioni infiammatorie croniche e fibrotiche. Un’alterata espressione di Cd163 è stata inoltre utilizzata come marcatore di stati macrofagici rilevanti per la malattia in contesti quali infezioni, infiammazione metabolica e biologia mieloide associata ai tumori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD163 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cd163 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cd163 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cd163 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD163.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cd163 per lo studio della segnalazione di CD163, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Cd163 critici per la funzione di CD163
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cd163 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD163 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CD163 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cd163. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD163 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CD163 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cd163 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cd163 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.