CD163 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429989
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD163 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD163, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD163 Anticorpo (ED2): sc-58965
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD163 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429989 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd163 codifica o CD163, um receptor “scavenger” enriquecido em macrófagos e monócitos que se liga a complexos hemoglobina–haptoglobina e favorece sua endocitose e depuração, conectando a reciclagem de ferro a programas inflamatórios da fase de resolução. O CD163 participa da regulação da imunidade inata por meio do tráfego endocítico e da modulação de respostas de citocinas, sendo comumente associado a fenótipos de macrófagos alternativamente ativados em contextos de reparo tecidual. Em modelos murinos, populações mieloides CD163-positivas são usadas para estudar microambientes inflamatórios, polarização de macrófagos e a comunicação cruzada entre células mieloides e estromais em condições inflamatórias crônicas e fibróticas. Alterações na expressão de Cd163 também têm sido exploradas como marcador de estados de macrófagos relevantes para doenças em cenários como infecção, inflamação metabólica e biologia mieloide associada a tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD163 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd163 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd163, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd163 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD163.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd163 para a investigação da sinalização de CD163, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd163 críticos para a função CD163
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd163 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD163 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD163 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd163. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD163 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD163 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd163 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd163 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.