CD161 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405895

概要

KLRB1は、CD161（KLRB1）をコードする遺伝子であり、NK細胞およびT細胞の一部サブセット（粘膜関連不変T〔MAIT〕細胞やTh17様集団など）に高発現するC型レクチン様受容体です。CD161は、自然免疫および獲得免疫応答を形作る受容体介在性経路を通じて、免疫調節シグナル伝達や細胞傷害活性・サイトカイン産生の調整に関与します。KLRB1/CD161の発現変化は免疫活性化状態や炎症性状況と関連しており、感染症、自己免疫、腫瘍免疫の研究において、機能的に異なるリンパ球サブセットを表現型分類するための指標として頻繁に用いられます。IL-17に偏った応答や組織ホーミングといったエフェクタープログラムに結び付く表面受容体として、CD161はリンパ球の分化と機能を解明するための扱いやすい切り口を提供します。

CD161 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKLRB1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KLRB1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KLRB1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD161タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD161シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KLRB1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD161の機能に不可欠なKLRB1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KLRB1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD161 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD161 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KLRB1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD161 HDRプラスミド（h）および CD161 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKLRB1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKLRB1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。