Partículas Lentivirales de Activación (h) CD16: sc-400544-LAC

El gen humano **FCGR3A** codifica **CD16 (FcγRIIIa)**, un receptor Fc de baja afinidad para IgG que se expresa de forma prominente en células NK (asesinas naturales), macrófagos y subpoblaciones de monocitos. La unión de CD16 a complejos inmunes inicia la señalización a través de cadenas adaptadoras con ITAM (FcRγ/CD3ζ), activando vías dependientes de Src/Syk que regulan la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos, la fagocitosis, la producción de citocinas y la modulación de los umbrales de la inmunidad innata. La variación en la expresión de FCGR3A y en la actividad del receptor influye en las funciones efectoras mediadas por Fc y se ha asociado con fenotipos de desregulación inmunitaria estudiados en autoinmunidad, infección crónica e inmunobiología del cáncer. Estas propiedades hacen de CD16 un marcador ampliamente utilizado y un nodo funcional para investigar la señalización de receptores Fc, los programas de activación de células NK y la biología de anticuerpos y complejos inmunes.

Las partículas de activación lentiviral CD16 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FCGR3A en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CD16 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FCGR3A, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CD16. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FCGR3A y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.