CD155 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-424585-ACT

O gene **Pvr** de camundongo codifica o **CD155**, uma molécula de adesão da superfamília das imunoglobulinas que atua como ligante do **DNAM-1 (CD226)**, bem como de receptores inibitórios como **TIGIT** e **CD96**, modulando a formação da sinapse imune e a atividade de linfócitos citotóxicos. O CD155 também favorece a adesão e a motilidade celular por meio de interações com a matriz extracelular e reguladores do citoesqueleto, conectando-se a processos que influenciam a remodelação tecidual e a inflamação. No sistema nervoso, é conhecido como um homólogo do receptor do poliovírus e contribui para a dinâmica de contato célula–célula. A expressão desregulada de CD155 é frequentemente estudada no contexto da imunologia tumoral, de interações virais e de mecanismos de evasão imune, tornando o **Pvr** um alvo útil para investigar a sinalização de imunorreceptores e a regulação do microambiente em modelos murinos.

CD155 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Pvr sem alterar a sequência de ADN subjacente.

CD155 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Pvr em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Pvr, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de CD155. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Pvr nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de CD155 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via CD155 em células tumorais com expressão de Pvr silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.