CD151 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401969-NIC

CD151 é uma glicoproteína de superfície celular da família das tetraspaninas que organiza microdomínios enriquecidos em tetraspaninas e modula a atividade e o tráfego de receptores parceiros, particularmente integrinas como α3β1, α6β1 e α6β4. Por meio dessas interações, CD151 influencia a adesão, o espalhamento e a migração celulares, bem como a transdução de sinais associada à remodelação do citoesqueleto, à dinâmica das adesões focais e ao engajamento com a matriz extracelular. A organização de membrana dependente de CD151 afeta processos como a integridade epitelial, o comportamento angiogênico e a motilidade de células imunes, e alterações na expressão ou na função de CD151 têm sido associadas à progressão tumoral, ao potencial metastático e a fenótipos de remodelamento tecidual. Como um regulador do tipo “andaime” (scaffold), CD151 constitui um ponto de entrada acessível para dissecar redes de sinalização associadas a integrinas e a compartimentalização de membrana em células humanas.

CD151 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD151 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD151. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD151. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD151 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.