CD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419532

概要

Cd151は、膜マイクロドメインを組織化し、インテグリン依存的な接着・遊走・シグナル伝達を調節するテトラスパニンであるCD151をコードします。CD151は、α3β1やα6β1/β4などのラミニン結合性インテグリンと会合し、フォーカルアドヒージョンの動態、細胞骨格の再構築、ならびにPI3K–AKTやMAPKを含む下流経路に影響を与えます。マウス系では、CD151の活性は上皮の恒常性、血管新生に関わる挙動、免疫細胞のトラフィッキングに寄与し、がんの浸潤、線維化、炎症性の組織リモデリングに関連するプロセスと結びついています。細胞外マトリックスとの相互作用における役割から、基底膜の構築や細胞間コミュニケーションを研究するうえでも有用な標的となります。

CD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd151遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd151内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd151のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD151タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD151シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd151欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD151の機能に不可欠なCd151エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd151ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD151 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd151遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD151 HDRプラスミド（m）および CD151 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd151ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd151標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。