CCDC8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406749

Visão geral

CCDC8 (coiled-coil domain containing 8) codifica uma proteína citoplasmática do tipo coiled-coil implicada na regulação de programas de crescimento e sobrevivência celular, com ligações relatadas à sinalização responsiva ao estresse e ao controle da capacidade proliferativa. Estudos funcionais sugerem que a CCDC8 pode influenciar a apoptose e processos relacionados a checkpoints, conectando-a a vias que moldam a homeostase celular e a suscetibilidade à transformação. A expressão alterada ou a disrupção de CCDC8 tem sido investigada no contexto da biologia tumoral, em que mudanças na regulação do crescimento e na sinalização de sobrevivência são características comuns. Esses atributos tornam a CCDC8 um alvo útil para dissecar mecanismos que acoplam funções de proteínas do citoesqueleto ou do tipo “andaime” (scaffold) à transdução de sinais e às decisões de destino celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CCDC8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCDC8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCDC8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCDC8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CCDC8.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCDC8 para a investigação da sinalização de CCDC8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCDC8 críticos para a função CCDC8
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCDC8 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CCDC8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CCDC8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCDC8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CCDC8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CCDC8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCDC8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCDC8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.