CBX7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424634

概要

Cbx7は、クロモボックス・タンパク質ホモログ7（CBX7）をコードしています。CBX7はH3K27me3を認識するクロモドメイン含有リーダーであり、ポリコーム抑制複合体1（PRC1）の中核構成要素として、安定した転写サイレンシングの維持に機能します。マウス細胞では、CBX7はクロマチンの凝集を促進し、発生関連遺伝子座や腫瘍抑制遺伝子座を抑制することで、系譜決定のエピジェネティック制御、細胞周期制御、老化に寄与します。CBX7依存的なポリコーム活性は、分化プログラムおよび幹細胞の自己複製ネットワークと交差し、長期的な遺伝子発現状態を形成します。CBX7機能の変化を含むポリコーム媒介性抑制の破綻は、異常なクロマチン制御の機序として、がん化、加齢関連表現型、発生疾患の研究において広く検討されています。

CBX7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCbx7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cbx7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cbx7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CBX7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CBX7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cbx7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CBX7の機能に不可欠なCbx7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cbx7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CBX7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCBX7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cbx7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CBX7 HDRプラスミド（m）および CBX7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCbx7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCbx7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。