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CBP/KAT3A/CREBBPCRISPR激活质粒(h) | sc-400200-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
CBP/KAT3A/CREBBPCRISPR激活质粒(h2) | sc-400200-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
CREBBP 编码 CREB 结合蛋白(CBP/KAT3A),它是一种转录共激活因子和赖氨酸乙酰转移酶,可对组蛋白及非组蛋白底物进行乙酰化,从而调控染色质可及性与基因表达。CBP 整合来自 CREB、核受体以及发育相关转录因子的信号,协同调控参与细胞周期控制、DNA 损伤应答、分化与神经元可塑性的多种程序。通过在增强子功能与转录延伸中的作用,CBP 参与 cAMP/CREB 信号通路等过程,并更广泛地参与对谱系特异性转录的表观遗传调控。CREBBP 活性或剂量的改变与神经发育表型相关,并在癌症相关的转录与染色质失调中反复被牵涉。
CBP/KAT3A/CREBBP CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CREBBP的表达。
CBP/KAT3A/CREBBP CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CREBBP基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CREBBP转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CBP/KAT3A/CREBBP表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CREBBP位点,并能够研究内源性位点上依赖于CBP/KAT3A/CREBBP的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CREBBP表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CBP/KAT3A/CREBBP通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。