Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CaSR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401749-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CaSRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CaSR (h) e o Plasmídeo Double Nickase CaSR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CASR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CaSR Anticorpo (6D4): sc-47741
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CaSR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401749-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaSR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401749-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CASR humano codifica o receptor sensor de cálcio (CaSR), um GPCR de classe C que detecta Ca2+ extracelular e coordena a sinalização intracelular para manter a homeostase do cálcio. A ativação do CaSR acopla-se principalmente a vias mediadas por Gq/11 e Gi/o, modulando a fosfolipase C, a mobilização de Ca2+ dependente de trifosfato de inositol (IP3) e a sinalização MAPK a jusante, que influencia secreção, excitabilidade e diferenciação. É altamente relevante para a fisiologia das paratireoides e dos rins, onde regula a liberação do hormônio da paratireoide (PTH) e o manejo tubular renal do cálcio. A sinalização desregulada do CASR e a variação genética estão associadas a distúrbios do equilíbrio do cálcio e a fenótipos endócrinos relacionados, tornando o CaSR um ponto útil para estudar a sinalização de GPCRs e a homeostase de íons minerais.
CaSR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CASR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CASR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CASR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CASR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.