CARD 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402214

概要

カスパーゼリクルートメントドメイン（CARD）ファミリーのメンバー9（CARD9）は、主に骨髄系細胞に発現するアダプタータンパク質で、パターン認識受容体から下流の炎症性シグナル伝達へと結び付ける役割を担います。CARD9はCARD9–BCL10–MALT1複合体として機能し、Dectin-1などのC型レクチン受容体を介して真菌や細菌成分を感知した後にNF-κBおよびMAPK経路の活性化を促進し、サイトカイン産生や自然免疫応答の偏り（分極化）を形成します。さらにCARD9は、抗菌エフェクタープログラムを統合的に調整することで、インフラマソーム関連応答や粘膜バリアにおける宿主防御にも影響します。CARD9の遺伝的多型やシグナル伝達の変調は、侵襲性真菌感染に対する感受性や炎症性表現型との関連が示されており、免疫学およびマイクロバイオーム研究における機序解明の要所（メカニスティック・ノード）としての有用性を支持しています。

CARD 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCARD9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CARD9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CARD9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CARD 9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CARD 9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CARD9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CARD 9の機能に不可欠なCARD9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CARD9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CARD 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCARD 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CARD9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CARD 9 HDRプラスミド（h）および CARD 9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCARD9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCARD9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。