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Carbonyl reductase 1双切口酶质粒(h) | sc-402755-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Carbonyl reductase 1双切口酶质粒(h2) | sc-402755-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CBR1 基因编码羰基还原酶 1(carbonyl reductase 1),这是一种位于细胞质、依赖 NADPH 的氧化还原酶,可催化将反应性醛和酮还原为相应的醇。该酶通过处理氧化应激和脂质过氧化过程中产生的内源性羰基化合物,以及多种外源性底物,从而参与维持细胞氧化还原稳态与解毒过程。通过这些作用,CBR1 与代谢应激反应相交织,并影响细胞对羰基负荷的敏感性。在炎症、代谢失衡以及肿瘤生物学等背景下,人们已研究 CBR1 表达或活性改变的影响,因为羰基应激与药物代谢通路会影响表型。
Carbonyl reductase 1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CBR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CBR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CBR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CBR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。