Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CAR Plasmide Double Nickase (m): sc-419887-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CAR Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CAR Double Nickase Plasmid (m) e il CAR Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cxadr. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CAR Antibody (E-1): sc-373791
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CAR Plasmide Double Nickase (m) | sc-419887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAR Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cxadr codifica il recettore per i virus Coxsackie e adenovirus (CAR), una molecola di adesione cellulare della superfamiglia delle immunoglobuline concentrata nelle giunzioni strette (tight junctions) degli epiteli e dell’endotelio. CAR contribuisce all’adesione intercellulare, alla polarità apico-basolaterale e all’organizzazione delle giunzioni attraverso interazioni con proteine scaffold e regolatori del citoscheletro, collegandolo a vie che governano l’integrità della barriera e la morfogenesi dei tessuti. Nei modelli murini, l’alterazione dell’espressione o della localizzazione di CAR viene studiata nel contesto della biologia dell’ingresso virale, dello sviluppo e della conduzione cardiaca e dell’omeostasi epiteliale, rendendo Cxadr un nodo utile per indagare le interazioni ospite–patogeno e la segnalazione dipendente dalle giunzioni.
CAR Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cxadr nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cxadr. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cxadr. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cxadr interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.