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CaMKKβ双切口酶质粒(h) | sc-400928-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaMKKβ双切口酶质粒(h2) | sc-400928-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMKK2 编码钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶 2(CaMKKβ),是一种上游丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)激酶,可将 Ca2+–钙调蛋白信号与 AMPK 以及 CaMKI/CaMKIV 的磷酸化连接起来,从而协调细胞能量感知、转录程序以及钙依赖性的应激反应。通过这些关键节点,CaMKKβ 影响代谢重编程、线粒体功能、自噬,并调控 mTOR、CREB 相关信号等下游通路。CAMKK2 的活性已在多种研究背景中得到探讨,包括癌细胞代谢、炎症与免疫细胞极化,以及神经元信号传导,因此也是解析钙驱动激酶级联反应的有用靶点。对 CAMKK2 的扰动可改变细胞增殖与存活表型,并在实验系统中与代谢及神经内分泌调控方面的疾病相关变化有关。
CaMKKβ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CAMKK2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CAMKK2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CAMKK2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CAMKK2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。