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CaMKIV双切口酶质粒(h) | sc-400806-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaMKIV双切口酶质粒(h2) | sc-400806-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMK4 编码钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IV(CaMKIV),这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,负责将来自钙调蛋白的 Ca2+ 信号传递到细胞核内的转录程序。CaMKIV 在 CaMKK 下游被激活,并调控 CREB、MEF2 等转录因子的磷酸化,从而将钙信号动态与基因表达、神经元可塑性以及活动依赖性的分化过程联系起来。该激酶还参与调控免疫细胞活化与细胞因子相关转录反应的通路;其功能失衡已在神经发育与神经精神表型以及免疫相关疾病等背景中受到研究。作为一种对核内 Ca2+ 信号有响应的调控因子,CaMKIV 常用于在人源细胞模型中研究刺激耦联的转录以及与染色质相关的信号传导。
CaMKIV 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CAMK4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CAMK4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CAMK4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CAMK4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。