CaM II Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400952-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CaM IIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CaM II (h) e o Plasmídeo Double Nickase CaM II (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CALM2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CaM II Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400952-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaM II Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400952-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CALM2 humano codifica a calmodulina (CaM II), um sensor de Ca2+ expresso de forma ubíqua que traduz sinais transitórios de cálcio em alterações coordenadas na atividade enzimática, no gating de canais iónicos e em programas transcricionais. Ao ligar-se e regular alvos como CaMKs, calcineurina, fosfodiesterases e sintases de óxido nítrico, o CALM2 contribui para o acoplamento excitação–contração, a plasticidade sináptica, o tráfego vesicular e o controlo do ciclo celular. A sinalização dependente de CALM2 interage com vias de quinases Ca2+/calmodulina (CaMK), cascatas de MAPK e remodelação do citoesqueleto para moldar respostas celulares dependentes do estímulo. A desregulação da sinalização da calmodulina e variantes dos genes da calmodulina estão associadas a excitabilidade elétrica anómala e a alterações da homeostase de Ca2+, o que motiva estudos mecanísticos em cardiomiócitos, neurónios e outros modelos de células excitáveis.
CaM II O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CALM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CALM2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CALM2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CALM2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.