Calnexin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400154-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CalnexinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Calnexin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Calnexin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CANX. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Calnexin Anticorpo (AF18): sc-23954
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Calnexin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400154-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Calnexin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400154-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **CANX** codifica a **calnexina**, uma chaperona lectina de membrana do retículo endoplasmático (RE) que se liga a glicanos N-ligados monoglicosilados para promover o dobramento e o controle de qualidade de glicoproteínas recém-sintetizadas. A calnexina atua no ciclo calnexina/calreticulina juntamente com a ERp57 para coordenar a formação de pontes dissulfeto, a retenção de clientes mal dobrados e decisões de tráfego na via secretória. Por seu papel na proteostase do RE, a CANX se conecta à resposta a proteínas mal dobradas (UPR), à degradação associada ao RE (ERAD) e à sinalização de estresse celular, que podem remodelar a apresentação de antígenos e programas de sobrevivência celular. O dobramento dependente de calnexina desregulado e o estresse do RE são frequentemente estudados no contexto de doenças por mau dobramento proteico, inflamação metabólica e demandas secretórias oncogênicas, tornando a CANX um nó funcional para a investigação mecanística de vias.
Calnexin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CANX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CANX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CANX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CANX interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.