Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-425312
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cacna2d2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Cacna2d2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cacna2d2: sc-365911，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-425312 | 20 µg | $397.00 |
概述
Cacna2d2 编码电压门控钙通道的 α2δ-2 辅助亚基，是调控通道转运、膜表面表达以及生物物理特性的关键因子，这些特性共同塑造了神经元兴奋性与突触传递过程中钙离子的内流。通过调节 CaV 钙通道功能，CACNA2D2 影响活动依赖性的信号传导、神经递质释放以及钙依赖的基因表达程序，从而对神经回路发育与可塑性产生作用。α2δ 亚基的遗传与功能改变已与多种神经发育和神经系统表型相关，其中 Cacna2d2 尤其与小脑功能及运动协调通路密切相关。这些特征使 Cacna2d2 成为在神经生物学与以电生理为重点的疾病模型中解析钙通道辅助机制的有用靶点。
Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Cacna2d2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Cacna2d2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Cacna2d2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Cacna2d2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Cacna2d2缺失的细胞模型，用于Cacna2d2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Cacna2d2 功能至关重要的 Cacna2d2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Cacna2d2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Cacna2d2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Cacna2d2 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Cacna2d2 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Cacna2d2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Cacna2d2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。